Hybridation in situ HIS

Cette méthode est une technique de détection indirecte qui vise les acides nucléiques. Son principe repose sur la propriété qu’ont 2 séquences nucléiques complémentaires de s’apparier de façon spécifique et extrêmement forte.

Les acides nucléiques sont des macromolécules qui sont des unités de structures de composants cellulaires telles que l’ADN ou l’ARN. En utilisant des sondes complémentaires couplées à un marqueur, il est possible d’étudier de façon précise la localisation ou l’expression d’un gène au sein d’un échantillon (lame, tissu, embryon).

Si cette technique est réalisée manuellement, elle devient très rapidement lourde à mettre en oeuvre, en particulier sur un objet tridimensionnel tel qu’un fragment de tissu ou un embryon. L’HIS sur un échantillon wholemount, nécessite entre 3 et 5 jours de manipulations difficiles ainsi que des chronométrages fastidieux entraînant des risques d’erreur et de dégradation des échantillons.

Grâce au Flo400, un automate de biotechnologie, les échantillons in toto sont soumis à un flux continu de sondes et de réactifs, ce qui permet un transfert des sondes jusqu’au noyau des cellules ainsi qu’une préservation de l’intégrité de l’échantillon. Le recyclage continu des sondes ARN et des solvants réduits le temps d’analyse et de lavages nécessaires à l’obtention des résultats.

Comme on peut le voir ci-dessous, on observe la localisation des gènes recherchés, marqués grâce aux réactifs et aux colorants, dans les embryons et cellules étudiés.

Domaines d’application : Biologie de développement, biologie végétale, dermo-cosmétique, oncologie, cancérologie, toxicologie…

L’automate Flo400 peut également effectuer les techniques :

La recherche en biologie ne cesse de se diversifier et de se complexifier par l’apparition des nouvelles technologies et par l’accumulation des connaissances. Ainsi, différents domaines d’application et d’expériences en biologie émergent et de nouvelles techniques de biologie à haute performance arrivent.

L’hybridation in situ, l’immunohistochimie et l’hybridation in situ en fluorescence sont des méthodes de marquage qui apportent une compréhension claire de l’expression de chaque gène dans un cadre spatial et temporel au sein d’un échantillon donné. Cela permet une caractérisation du protéome ou du génome de  l’organisme étudié.

La société Flogentec propose ainsi des automates de biologie pouvant avoir plusieurs applications différentes suivant votre domaine de recherche.

Le Flo400 est un dispositif de recherche sûr, rapide et facile d’utilisation, qui permet d’analyser des échantillons 3D par la méthode de l’hybridation in situ et de l’immunohistochimie. Grâce à cet équipement, on peut visualiser directement la localisation et l’activation des gènes dans les cellules concernées. Le moyen employé pour cette localisation est l’hybridation in situ (HIS) des sondes ARN (analyse du transcriptome). Notons que l’automate permet également une analyse du protéome par immunohistochimie, en utilisant des anticorps à la place des sondes ARN.